RIPA裂解液(RIPA Buffer)Cat No. SizeBDIT0037-50 50mlBDIT0037-100 100ml产品描述本品是裂解贴壁或悬浮培养的哺乳动物细胞的理想试剂,可用于提取胞浆、胞膜及细胞核内的蛋白,提出的蛋白可以用于包括蛋白纯化、蛋白分析和免疫分析等多种实验。保存4℃保存,常温运输。操作方法(哺乳动物贴壁细胞)1. 根据实验所需取合适数量的细胞。2. 完全去除贴壁细胞培养液(用真空吸出)。3. 用冰预冷的PBS 洗细胞2次。4. 加入冰预冷的RIPA 裂解液(如果需要,可在此处添加蛋白酶和磷酸化酶抑制剂)。每个75 cm2 方瓶或10cm 培养皿的细胞上面加1ml 裂解液,继续放冰上5分钟,期间晃动几次以确保覆盖均匀。5. 用细胞刮刀将细胞刮下来,并转移至离心管中。6. 13,000 – 15.000 ×g 离心15分钟。可选:如果想提高产量,可对沉淀进行30秒的超声(50%间隔脉冲)6. 将上清转移至新管中,进行后续实验。注意事项1. 本品不含蛋白酶或磷酸酶抑制剂,但如果需要,可在使用前添加上述抑制剂,以避
免发生蛋白降解和磷酸化。2. 经本品处理得到的样品可直接用于BCA 蛋白检测试剂盒和DC 蛋白检测试剂盒。3. 本品在4℃长时间放置,可能会出现沉淀。属正常现象,只需把本品放在室温平衡10 分钟,即可将沉淀重新溶解。4. 每1ml RIPA 裂解液可处理5 × 106 细胞。
RIPA裂解液